2

掌握獲取目的基因的3種途徑

(1)直接分離：

從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫中獲取。

(2)人工合成目的基因(常用方法如下)

①化學(xué)合成法：已知核苷酸序列的較小基因，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板。

②人工合成法：以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下人工合成。

(3)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。

3

牢記基因表達(dá)載體的構(gòu)建

(1)基因表達(dá)載體的組成：目的基因＋啟動子＋終止子＋標(biāo)記基因＋復(fù)制原點。

(2)啟動子和終止子：啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，啟動轉(zhuǎn)錄；終止子是終止轉(zhuǎn)錄的位點。

(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程

4

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

5

理清目的基因的檢測與鑒定

(1)導(dǎo)入檢測：DNA分子雜交技術(shù)(使用DNA探針)

(2)表達(dá)檢測

(3)個體生物學(xué)水平鑒定：如對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行抗蟲或抗病等的接種實驗。

6

關(guān)注植物組織培養(yǎng)的5個易錯點

(1)幼嫩的組織脫分化較為容易，如莖尖、根尖、形成層細(xì)胞易脫分化，而植物的莖、葉和成熟的組織則較難。

(2)脫分化形成愈傷組織的過程不需要光，再分化過程需要光，因為愈傷組織利用有機(jī)營養(yǎng)成分，而試管苗需要進(jìn)行光合作用以自養(yǎng)。

(3)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物時，有時只需將外植體培養(yǎng)到愈傷組織，從愈傷組織中獲取產(chǎn)物。

(4)人工種子發(fā)育初期需要的營養(yǎng)物質(zhì)由人工胚乳提供。

(5)植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)過程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過程，但植物細(xì)胞可以先分裂再分化，而動物細(xì)胞不分化只分裂。

7

理清3種細(xì)胞的區(qū)別

(1)雜種細(xì)胞：植物體細(xì)胞雜交過程中，兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合，融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。

(2)重組細(xì)胞：體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。

(3)雜交細(xì)胞：動物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。

8

4個易錯點

關(guān)注植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合的4個易錯點

(1)植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合中酶的作用對象不同，纖維素酶和果膠酶作用于細(xì)胞壁，而胰蛋白酶等作用于細(xì)胞間的蛋白質(zhì)。

(2)滅活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。

(3)植物雜交細(xì)胞在激素誘導(dǎo)下能表達(dá)出全能性，但動物雜交細(xì)胞的全能性不能表達(dá)。

(4)克隆動物的起點是經(jīng)過核移植后形成的重組細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)主要來自供體，因此形成的個體性狀主要同供體，但也有部分性狀同受體。

9

規(guī)避克隆與試管動物的3個誤區(qū)

(1)誤區(qū)一：試管動物與克隆動物的產(chǎn)生都是無性生殖。

糾正：試管動物的產(chǎn)生是有性生殖，克隆動物的產(chǎn)生是無性生殖。

(2)誤區(qū)二：試管動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體外進(jìn)行的，克隆動物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體內(nèi)進(jìn)行的。

糾正：試管動物(哺乳類)和克隆動物(哺乳類)早期胚胎之前都是在體外進(jìn)行的，早期胚胎經(jīng)過胚胎移植之后是在體內(nèi)進(jìn)行的。

(3)誤區(qū)三：胚胎移植的優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，因此胚胎移植的胚胎只能來自體內(nèi)受精的胚胎。

糾正：胚胎移植的胚胎有三個來源：體內(nèi)正常受精產(chǎn)生的胚胎、核移植產(chǎn)生的重組細(xì)胞培養(yǎng)而來的胚胎、體外受精產(chǎn)生的早期胚胎。

真題回放

1.（2016江蘇卷.33）下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題：

（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用______兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過__________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于__________________態(tài)的大腸桿菌。

（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加__________，平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中_____________。

（3）若BamH  I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為          ，對于該部位，這兩種酶          （填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。

（4）若用Sau3A I切圖1質(zhì)粒最多可能獲得    種大小不同的DNA片段。

【答案】

（1）BclⅠ和HindⅢ   連接   感受 

（2）四環(huán)素   引物甲和引物丙

（3）都不能  

（4）7

【解析】

(1)根據(jù)圖中質(zhì)粒和目的基因的特點，質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因可以作為標(biāo)記基因，至少要保留一個標(biāo)記基因，所以不可以選用BamHⅠ酶或Sau3AⅠ酶(BamHⅠ酶和BclⅠ酶識別的序列也可以被Sau3AⅠ酶識別并切割)，否則會破壞兩個標(biāo)記基因，再結(jié)合目的基因的結(jié)構(gòu)特點，構(gòu)建重組質(zhì)粒時應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶切割；酶切后的載體和目的基因片段所形成的缺口，通過DNA連接酶作用后可以進(jìn)行連接，獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，可以用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，此時大腸桿菌需處于感受態(tài)，容易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。

(2)用上述限制酶切割了DNA分子后，只能以四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因，為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加四環(huán)素。用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，根據(jù)圖2中引物的特點和延伸的方向可知，所用的引物組成為圖2中引物甲和引物丙。

(3)根據(jù)圖中BamH Ⅰ酶和Bcl Ⅰ酶識別的序列特點和切割位點可知，若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端相互連接后，連接部位的6個堿基對序列為： 或 ；對于該部位，圖中BamHⅠ酶和BclⅠ酶都無法識別并切割，所以這兩種酶都不能切開。

(4)若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒，根據(jù)Sau3AⅠ識別的特點，可以在質(zhì)粒的BamHⅠ酶和BclⅠ酶所在的三個位點隨機(jī)切割DNA分子，若只切割圖中任何1個切口，就會形成1種大小的DNA分子；若只切割圖中任何2個切口，就會形成6種大小不同的DNA分子；若同時切割圖中3個切口，所形成的3種DNA分子片段與只切割圖中任何2個切口中的3種DNA片段大小相同，所以最多可能獲得7種大小不同的DNA片段。

2.（2016課標(biāo)1卷.40）某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有______________（答出兩點即可）。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。

（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是______________；并且______________和______________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是_____________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有是_____________的固體培養(yǎng)基。

（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于_____________。

【答案】

（1）能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個至多個限制酶切割位點（答出兩點即可）

（2）二者均不含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上都不能生長  含有質(zhì)粒載體  含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒（或答含有重組質(zhì)粒）  二者都含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長  四環(huán)素

（3）受體細(xì)胞

【解析】

(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的條件：必須有一個或多個限制酶的酶切位點；必須有自我復(fù)制的能力；具有標(biāo)記基因；必須是安全的，不會對受體細(xì)胞造成傷害；分子大小合適，答任意兩點都可以。

(2)未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的大腸桿菌由于二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上均不生長，所以二者不能區(qū)分；含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或答含有重組質(zhì)粒)的大腸桿菌由于二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長，所以二者不能區(qū)分。若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，由于質(zhì)粒載體使用了BamHⅠ酶切后，破壞的是四環(huán)素抗性基因，使細(xì)胞失去了四環(huán)素抗性，而質(zhì)粒載體上的四環(huán)素(抗性)基因功能完好，因此含有質(zhì)粒載體的細(xì)胞可以在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，而含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，所以還需使用含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。

(3)基因工程中，某些改造后的噬菌體作為載體，由于噬菌體屬于病毒，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只有蛋白質(zhì)和核酸，只能營寄生生活，所以病毒DNA的復(fù)制原料來自受體細(xì)胞(大腸桿菌)。

3.（2016新課標(biāo)Ⅲ卷.40）圖（a）中的三個DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點，圖（b）為某種表達(dá)載體示意圖（載體上的EcoR I、Sau3A I的切點是唯一的）。

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：

（1）經(jīng)BamH I酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被____________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是____________。

（2）若某人利用圖（b）所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有____________，不能表達(dá)的原因是____________。

（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有____________和____________，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是____________。

【答案】

（1）Sau3AⅠ    兩種梅切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端

（2）甲和丙     甲中目的基因插入在啟動子的上游， 丙中目的基因插入在終止子的下游，兩者目的基因均不能轉(zhuǎn)錄

（3）E·coliDNA連接酶    T4DNA連接酶     T4DNA連接酶

【解析】

(1)HⅠ酶和Sau3AⅠ酶的識別序列中都包括了，且在同一位點將磷酸二酯鍵斷裂，從而形成相同的黏性末端，在DNA連接酶的作用下可彼此連接。(2)完整的基因表達(dá)載體包括啟動子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因，其中啟動子和終止子起轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，必須分布于目的基因的上游和下游。(3)DNA連接酶根據(jù)來源不同可分為兩類，一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coli DNA連接酶，另一類是從T4噬菌體中分離得到的，稱為T4 DNA連接酶，E·coli DNA連接酶只能連接黏性末端，T4 DNA連接酶既能連接黏性末端又能連接平末端，但連接平末端的效率較低。

4.（2016天津卷.7）(12分)人血清白蛋白(HSA) 具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

（1）獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。

（2）啟動子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母，單選）。

A.人血細(xì)胞啟動子   B.水稻胚乳細(xì)胞啟動子  C.大腸桿菌啟動子 D.農(nóng)桿菌啟動子

（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是__________________________。

（4）人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑II相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是_______________________________________。

（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認(rèn)rHSA與_________________的生物學(xué)功能一致。

【答案】

（1）總RNA （或mRNA）

（2）B

（3）吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化

（4）水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工

（5）HAS

【解析】

(1)為了獲取HSA基因，可從人的血液中提取總RNA(或mRNA)逆轉(zhuǎn)錄成總cDNA，再以cDNA為模板用PCR技術(shù)擴(kuò)增。引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，一個引物與含有目的基因一端的一條DNA模板鏈互補，則另一個引物與含有目的基因另一端的一條DNA模板鏈互補，方向是相反的。

(2)構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異性表達(dá)rHSA的載體，所選的啟動子必須是能夠在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異性表達(dá)的基因的啟動子，符合題意的是B。

(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，添加酚類物質(zhì)，目的是吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化。

(4)途徑Ⅰ獲取rHSA能通過水稻細(xì)胞的膜系統(tǒng)加工，而途徑Ⅱ經(jīng)過大腸桿菌(原核細(xì)胞，無生物膜系統(tǒng))獲取，無法對初始rHSA進(jìn)行加工修飾，所以途徑Ⅰ的優(yōu)勢是水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工。

(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認(rèn)rHSA與HSA的生物學(xué)功能一致。

6.（2016海南卷.31）基因工程又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：

（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即______和從_______中分離。

（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是______。

（3）在基因表達(dá)載體中，啟動子是______聚合酶識別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是______。

（4）將目的基因通過基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有_____和______顆粒。

【答案】

（1）人工合成   生物材料

（2）cDNA文庫中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄（或已表達(dá)）的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因

（3）RNA   大腸桿菌（或答細(xì)菌）

（4）金粉   鎢粉

【解析】

（1）獲取目的基因主要有兩大途徑，即人工合成和從自然界已有的物質(zhì)中分離。

（2）植物的成熟葉片中基因選擇性表達(dá)，因此由所有的RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA文庫中含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因。

（3）在基因表達(dá)載體中，啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位。采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，由于易于培養(yǎng)，最常選用大腸桿菌（或細(xì)菌）

（4）將目的基因通過基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒。

7.（2016上海卷.九）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題。

在圖27所示的質(zhì)粒PZHZ11（總長為3.6kb，1kb=1000對堿基因）中，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍(lán)色。

（1）若先用限制酶BamHI切開pZHZ11，然后滅活BamHI酶，再加DNA連接酶進(jìn)行連接，最后將連接物導(dǎo)入足夠數(shù)量的大腸桿菌細(xì)胞中，則含3.1kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為     ；含3.6kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為                 。

（2）若將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因片段置換pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成4.9kb的重組質(zhì)粒，則目的基因長度為       kb。

（3）上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段；那么聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得       kb和       kb兩種DNA片段。

（4）若將人的染色體DNA片段先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中克隆并鑒定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞中表達(dá)，最后將產(chǎn)物的藥物蛋白注入小鼠體內(nèi)觀察其生物功能是否發(fā)揮，那么上述過程屬于      。

A.人類基因工程              B.動物基因工程     

C.植物基因工程              D.微生物基因工程

【答案】

（1）白色  白色和藍(lán)色/白色或藍(lán)色

（2）1.8

（3）1.4  3.5

（4）C

【解析】

（1）3.1 kb質(zhì)粒lacZ基因被破壞，含3.1 kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為白色；加DNA連接酶進(jìn)行連接，被切下的片段可能反向連接，所含3.6 kb質(zhì)粒的細(xì)胞可能含有正常質(zhì)粒和異常質(zhì)粒，也可能只含有正常質(zhì)粒或異常質(zhì)粒，顏色為白色和藍(lán)色，或者為白色或藍(lán)色。

（2）pZHZ11中0.5 kb的BamHI酶切片段被切除后，剩余3.1kb，將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因插入，形成4.9 kb的重組質(zhì)粒，則目的基因大小為4.9-3.1=1.8kb。

（3）限制酶BamHI和BglHI切割產(chǎn)生的黏性末端可以進(jìn)行連接，但連接后不能被兩者中的任何一個識別并切割，用BamHI切割4.9 kb的重組質(zhì)粒，只有一個切割位點。用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7 kb和3.2 kb兩種DNA片段；聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒，可獲得1.7+1.8=3.5kb和3.2-18=1.4kb兩種DNA片段。

（4）題干所述目的是讓人的基因在植物細(xì)胞中表達(dá)，屬于植物基因工程。

5.2 胚胎工程、生物技術(shù)的安全性和倫理問題、生態(tài)工程

知識體系

核心提煉

1. 把握胚胎工程的操作流程

(1)胚胎移植的4個結(jié)論

①胚胎移植實質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)換；胚胎移植的優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛能。

②胚胎移植過程中兩次使用激素，第一次常用孕激素對受、供體進(jìn)行同期發(fā)情處理；第二次用促性腺激素對供體做超數(shù)排卵處理。

③胚胎移植過程中的兩次檢查：第一次對收集的胚胎進(jìn)行檢查；第二次對受體母牛是否妊娠進(jìn)行檢查。

④胚胎移植是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎是由受精卵形成的，還是由核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞并發(fā)育而成或胚胎分割形成的。

(2)胚胎分割的2個注意事項

①材料選擇：選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。

②分割注意點：選材為囊胚時，注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

(3)胚胎工程中受精作用的3個關(guān)鍵點

①受精的標(biāo)志是在透明帶和卵細(xì)胞膜之間觀察到兩個極體。

②受精完成的標(biāo)志是雌、雄原核的融合。

③體外受精時，卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，精子需要獲能。

2. 治療性和生殖性克隆的區(qū)別和聯(lián)系

　　類型

項目　　

治療性克隆

生殖性克隆

區(qū)

別

目的

從胚胎中取出干細(xì)胞用于醫(yī)學(xué)研究和治療

用于生育，獲得人的復(fù)制品

水平

細(xì)胞水平

個體水平

聯(lián)系

都屬于無性生殖；產(chǎn)生新個體或新組織，遺傳信息相同

3.試管嬰兒和設(shè)計試管嬰兒的異同點

(1)設(shè)計試管嬰兒比試管嬰兒多出的是過程④。

(2)試管嬰兒主要是解決不孕夫婦的生育問題，設(shè)計試管嬰兒用于白血病、貧血癥等疾病的治療。

(3)兩者都是體外受精，并進(jìn)行體外早期胚胎培養(yǎng)，都要經(jīng)過胚胎移植，都是有性生殖。

4.理清生態(tài)工程的原理和實例

5.明確生態(tài)工程基本原理的判斷方法

(1)強調(diào)物質(zhì)循環(huán)、廢物利用、減輕環(huán)境污染→物質(zhì)循環(huán)再生原理。

(2)體現(xiàn)物種多，營養(yǎng)關(guān)系復(fù)雜→生物多樣性原理。

(3)強調(diào)生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡；涉及環(huán)境承載力→協(xié)調(diào)與平衡原理。

(4)涉及自然、經(jīng)濟(jì)和社會；指整個系統(tǒng)，如林業(yè)生態(tài)工程建設(shè)→整體性原理。

(5)涉及結(jié)構(gòu)、功能，分布式、集中式、環(huán)式→系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理(系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理)。

(6)涉及系統(tǒng)組分的比例關(guān)系、總體功能大于各部分之和，指系統(tǒng)內(nèi)部，如互利共生→系統(tǒng)整體性原理(系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理)。

6.根據(jù)實例，確定生態(tài)工程的原理

生態(tài)工程實例

生態(tài)工程原理

無廢棄物農(nóng)業(yè)

遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理

在人工林中增加植被層次

遵循物種多樣性原理

太湖水體富營養(yǎng)化引起大面積水華

違反協(xié)調(diào)與平衡原理

前面造林，后面砍樹

違反整體性原理

真題回放

5.（2016課標(biāo)全國Ⅱ卷.40)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物（二倍體）的流程。

回答下列問題：

（1）圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為____________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時期再進(jìn)行，去核時常采用_______的方法。②代表的過程是__________。

（2）經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中______的穩(wěn)定性會降低，因此，選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。

（3）若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是______。

（4）與克隆羊“多莉（利）”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了__________。

【答案】

（1）XX或XY  顯微操作（去核法）  胚胎移植

（2）遺傳物質(zhì)  

（3）卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響

（4）已經(jīng)分化的動物體細(xì)胞核具有全能性。

【解析】

(1)核移植技術(shù)中，供體可以是雌性也可以是雄性，因此，A的性染色體組成可為XX或XY；去核的方法是顯微操作，將早期胚胎移入代孕個體的技術(shù)是胚胎移植。

(2)動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)至10～50代時，部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)(核型)可能會發(fā)生變化，因此，核移植技術(shù)中的供體細(xì)胞應(yīng)為傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞。

(3)克隆動物的遺傳物質(zhì)來源于兩個個體，其核基因來自于供體，細(xì)胞質(zhì)基因來自于受體(卵母細(xì)胞)，細(xì)胞質(zhì)基因也會影響克隆動物的性狀。

(4)克隆動物的成功獲得證明了動物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。